أنواع الميديا المستخدمة في زرع البكتيريا
MacConkey's medium
- وهي للتعرف علي البكتيريا المخمرة لسكر اللاكتوز ( لون أحمر أو وردي ) والتي لا تخمره ( نفس لون البيئة ) وتنمو فيها عائلة البكتيريا المعوية.
Blood agar
- بعض أنواع البيئات لا تنمو إلا بوجود الدم مثل الالتهاب السحائي الوبائي - الالتهاب الرئوي.
- بعض أنواع البكتيريا تفرز خمائر تذيب كرات الدم الحمراء فيمكن التعرف عليها مثل الأنواع المختلفة من المكورات السبحية، وأهميتها في تمييز نوع التحلل ألفا، بيتا، جاما.
Chocolate agar
- يستخدم في مزارع الالتهاب الرئوي - السيلان - الأنفلونزا.
- وأهميتها أيضاً في تمييز نمو بكتيريا نيسيريا، وهيموفيلس.
Nutrient agar
- لعمل الحساسية ومعرفة المضاد الحيوي المناسب.
ملاحظات هامة عند الزرع
- يلاحظ عند أخذ العينة باللوب المعدني التأكد من ملء دائرة اللوب بالعينة وإخراجها من الأنبوبة باحتراس حيث لا تلمس جدار الأنبوبة ( ويوجد الآن Sterile Swab جاهزة بدلاً من استعمال اللوب المعدني ).
- عند الزرع علي الطبق يراعي عدم الضغط علي طبق المزرعة مما يؤدي إلي تجريح سطح الطبق.
- يلاحظ فتح الطبق بمقدار معين وغلقه بعد وضع المزرعة بسرعة بحيث لا يتعرض للتلوث وإبعاد الطبق عن التنفس أثناء الزرع لعدم تلوث الطبق بالبكتيريا الموجودة في زفير الشخص الذي يزرع المزرعة.
- وضع الطبق في الحضانة بحيث يكون الغطاء لأسفل ويتم قراءة الأطباق في اليوم التالي وتتم القراءة أولاً بعمل عدّ المستعمرات Colony Count وتصنف كالآتي:
- إذا لاحظت نمو أكثر من نوعين من المستعمرات علي نفس الطبق فإن ذلك يعني تلوث ويتوجب طلب عينة أخري ويتم زرعها.
- إذا كان عدد المستعمرات أقل من 10 مستعمرات فإن ذلك يهمل وتعتبر عقيمة No Significant Growth.
- إذا كان عدد المستعمرات من 10 - 19 مستعمرة فإنه يعتبر مشكوك فيها ويتم عمل حساسية له وتكتب النتيجة النهائية له.
- إذا كان عدد المستعمرات أكثر من 20 مستعمرة فإن ذلك يعتبر نمو حقيقي ويتم عمل اختبارات الحساسية له.
كيفية تحديد نوع الميكروب الذي يظهر علي الطبق
ولتحديد نوع الميكروب الذي ظهر علي الطبق نقوم بعمل صبغة جرام كما يلي:
الاستجابة لصبغة جرام ( سالبة أو موجبة )
- الجدار الخلوي هو الذي يعطي للخلية البكتيرية شكلها الثابت والمميز، كما أنه يقوم بحماية محتويات الخلية الداخلية ويتركب الجدار من مادتين هما مادة الكربوهيدرات والببتيدات، وتقسم البكتيريا إلي نوعين رئيسيين وذلك وفقاً لقدرة الجدار علي تقبل صبغة الجرام.
1- خلايا بكتيرية موجبة لصبغة جرام ( Gram +ve )
- وهي الخلايا التي يسمح الجدار الخلوي فيها بنفاذ الصبغة مما يؤدي إلي تلون السيتوبلازم باللون البنفسجي أو الأزرق، وعند غسل الخلايا بالكحول فإن بعض الخلايا لا تسمح بخروج الصبغة مرة أخري وبذلك تحتفظ باللون البنفسجي أو الأزرق.
2- خلايا بكتيرية سالبة لصبغة جرام ( Gram -ve )
- هذه البكتيريا لا يستطيع جدارها الاحتفاظ بالصبغة ويمكنها أن تصبغ بصبغة معاكسة مثل صبغة الصفرانين الحمراء، وتعتبر صبغة جرام من الصفات الهامة في التعرف علي البكتيريا ولها دور مهم في تشخيص الكثير من الأمراض التي تسببها.
