فكرة عمل أجهزة عدّ الدم الأوتوماتيك Sysmex or Coulter
هذه الأجهزة وغيرها مثل Sysmex, Coulter staker, Coulter S880, Beckman Coulter 890 باختلاف موديلاتها ،
مصممة لعمل الاختبارات التالية: RBC, WBC, Plt, Hb, Hct or PCV, MCH, MCHC, MCV, MPV, RDW
وتحديد الصيغة التفريقية لكرات الدم البيضاء ويتم قياسها في نفس الوقت وفي زمن قياسي لا يتعدّي الدقيقة.
تقنيتان أساسيتان مستخدمة لعدّ الخلايا
أولاً: العدّ الخلوي بالإعاقة الكهربائية Electrical Impedance Cell Counting
المبدأ: خلايا الدم ضعيفة التوصيل كهربائياً Poor Conductor لذا لابد من تعليق أو مزج الدم بمحلول موصل للكهرباء Electrolyte Solution
ثم يقوم الجهاز بتمرير الدم عبر فتحة ضيقة تسمي Aperture or Opening قطرها حوالي 100 um أكبر من قطر الخلايا الحقيقي،
ثم يتم تسريب التيار الكهربائي عبر الفتحة من خلال المحلول الممزوج بالدم من قطب لآخر عبر الفتحة الضيقة.
الخلايا الغير موصلة سوف تعيق التيار الكهربائي Impedance / Interruption وهذه الإعاقة تسبب نبضات أو دفعات كهربائية Pulses في الدائرة الكهربائية هذه النبضات تعد علي أنها خلايا.
حجم الإعاقة الكهربائية تتناسب مع حجم الخلية المسببة لذلك. لذا بعض الأجهزة تسجل عدد الخلايا المارة وحجمها.
ثانياً: العدّ الخلوي بالتشتيت الضوئي Light Scattering Cell Counting
المبدأ: نفس المبدأ السابق لكن بدل الكهرباء هناك ضوء، والضوء المستخدم هو Laser beam or Tungsten-halogen وهذا الضوء
يكون مسلط أو ساقط علي الخلايا المارة في الفتحة، وهذا الضوء له مستقبلين يسميان بالكاشف الضوئي Photo Detector ، فعندما تمر الخلايا تشتت الضوء النافذ إلي مستقبل الكاشف الضوئي الآخر وبالتالي يتم العدّ ، وحجم الخلية هو أهم مؤثر علي تشتيت الضوء.
أمثلة للأجهزة: Bayer ADVIA 120
وهناك أجهزة تستخدم كلا المبدأين مثل: ABBOTT cell - Dyan 3500
طريقة عمل الجهاز للعدّ والتفرقة بين الخلايا
هذه الأجهزة تحوي مكانين لعدّ الخلايا:
- مكان يتم فيه عدّ RBCs, Plt بدون إضافة أي محلول محلل.
- مكان يتم فيه عدّ WBCs, Hb بعد إضافة المحاليل المحللة للدم.
المكان الأول: يتم فيه عدّ RBCs, Plt
حيث يتم عدّ RBCs كما مر معنا ، أما Plt فنضع محاليل تحرض الصفائح علي التجمع ( التكدس ) Aggregation
مثل Collagen, Epinephrine or Ristocetin ، حيث أن كمية المحلول المضاف والضوء النافذ علي الصفائح المتخثرة يتناسب مع درجة التجمع.
المكان الثاني: يتم فيه عدّ WBCs, Hb
الهيموجلوبين: يقاس بطريقة درابكن Drabkin أو Haemoglobincyanide ( HICN ) حيث يتم إضافة محلول درابكن Drabkin Solution الذي يحتوي علي Potassium Ferricyanide and Potassium Cyanide حيث يعمل علي تحليل RBC
والهيموجلوبين يتأكسد بواسطة Ferricyanide إلي Methemoglobin الذي له خاصية الرجوع إلي أصله ، لذا يتحول إلي HICN بواسطة Cyanide ثم يتم امتصاص الطول الموجي له بواسطة جهاز الطيف الضوئي علي طول موجي 540 nm.
أما WBC: فهناك أجهزة تعتمد في قراءتها علي 3 parts من كرات الدم البيضاء هم:
Lymphocyte , Granulocyte , MID or MXD ( Monocytes + Eosinophils + Basophils )
وهناك أجهزة أخري تعتمد في قراءتها علي 5 parts هي:
Lymphocyte , Monocyte , Granulocyte , Eosinophil and Basophil
